Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo czesc 4

CETP przenosi CE z HDL na lipoproteiny zawierające apoB w zamian za triglicerydy, a zatem odgrywa ważną rolę w metabolizmie HDL-C (32). Przenoszenie HDL CE za pośrednictwem CETP do lipoprotein zawierających apoB z późniejszym wychwytem zależnym od receptora w wątrobie może być ważną drogą RCT u gatunków, które eksprymują CETP. Rzeczywiście, badanie kinetyczne u ludzi sugerowało, że zdecydowana większość wstrzykniętego znacznika CE HDL, który ostatecznie został wydalony do żółci, została pobrana przez wątrobę po przeniesieniu do lipoprotein zawierających apoB (27). Co ważne, większość wstrzykniętego znacznika UL HDL, który został wydalony z żółcią, został przeniesiony bezpośrednio do wątroby z HDL (27). W każdym przypadku ilościowa rola wątrobowego SR-BI w regulacji makrofagów RCT u ludzi i innych gatunków, które eksprymują CETP może być różna niż u myszy. Skupiamy się tutaj na roli wątrobowego SR-BI w makrofagach RCT, ponieważ badania nadekspresji były specyficzne dla wątroby i ponieważ brak wątroby SR-BI u myszy z nokautem jest najbardziej prawdopodobną przyczyną obserwowanych wyników. Jednak SR-BI ulega również ekspresji w jelicie (33 36), a najnowsze dane sugerują, że jelito może również odgrywać rolę w bezpośrednim wydalaniu cholesterolu jako niezależnej od wątroby ścieżki w RCT (37, 38). W jelicie cienkim SR-BI ulega ekspresji zarówno w punktach końcowych, jak iw bocznych (33, 36). Chociaż nie ma bezpośrednich dowodów na to, że SR-BI bierze udział w selektywnym wychwycie HDL-C w osoczu do enterocytów jelita cienkiego, niektóre badania sugerują, że może tak być (38). Tak więc, nasze dane pokazujące zmniejszoną liczbę RCT makrofagów na kale u myszy z knock-outem SR-BIa mogą potencjalnie być pod wpływem braku jelitowego SR-BI u tych myszy. SR-BI ulega również ekspresji w makrofagach i może promować wypływ cholesterolu do HDL in vitro (39, 40). Myszy pozbawione SR-BI specyficznie w komórkach pochodzących z szpiku kostnego rozwijają przyspieszoną miażdżycę tętnic w porównaniu z myszami typu dzikiego (15, 41, 42) (chociaż ten efekt może zależeć od stadium aterogenezy, odnośnik 42). Zgodnie z naszą wiedzą, nie odnotowano odwrotnego eksperymentu polegającego na odtworzeniu ekspresji makrofagów SR-BI u myszy z niedoborem SR-BI3. Co ważne, myszy z niedoborem komórek SR-BI pochodzących ze szpiku kostnego znacznie zmniejszyły miażdżycę tętnic w porównaniu z totalnymi myszami z nokautem SR-BI, co sugeruje, że niedobór SR-BI w innych tkankach przyczynia się zasadniczo do zwiększonej miażdżycy tętnic. W niniejszych badaniach wyznakowane, wstrzyknięte komórki J774 eksprymowały SR-BI, a zatem nasze badania nie odnoszą się bezpośrednio do roli makrofagów SR-BI w RCT. Konieczne są dalsze badania w celu określenia funkcjonalnego znaczenia makrofagów SR-BI do RCT in vivo. Warto zauważyć, że SR-BI jest również silnie eksprymowany w nadnerczach, gdzie służy do dostarczenia cholesterolu do steroidogenezy (40). W naszych badaniach na myszach z niedoborem SR-BI, zebraliśmy nadnercza i odkryliśmy, że myszy z niedoborem SR-BI (3 znacząco obniżały poziom cholesterolu [3H] po 48 godzinach w porównaniu z myszami typu dzikiego (0,15%. 0,03% w porównaniu z 0,27%). 0,04% wstrzykniętego [3H] cholesterolu; P <0,05). Podsumowując, wykazaliśmy, że wątrobowa ekspresja SR-BI odgrywa ważną rolę regulatorową w tempie RCT makrofagów do odchodów w sposób odwrotny do wpływu ekspresji wątrobowego SR-BI na stacjonarne poziomy HDL w osoczu. DO. Wpływ wątrobowej ekspresji SR-BI na makrofagi RCT może pomóc w wyjaśnieniu wpływu ekspresji wątrobowego SR-BI na miażdżycę i służy jako najwyraźniejszy dowód dotychczasowej zasady, że stężenie HDL-C w stanie stacjonarnym w osoczu niekoniecznie jest predykcyjne. tempa makrofagów RCT. Metody hodowli komórkowej J774, obciążenia acetylowanego cholesterolu LDL i znakowania [3H] cholesterolu. Komórki J774 hodowano w zawiesinie w RPMI 1640 uzupełnionej 10% FBS, jak opisano wcześniej (17). Komórki znakowano radioaktywnie 5. Ci / ml [3H] cholesterolu i cholesterolu wzbogaconego acetylowanym LDL przez 48 godzin, przemywano dwukrotnie, równoważono w RPMI plus 0,2% BSA przez 6 godzin, wirowano i ponownie zawieszano w pożywce RPMI bezpośrednio przed użyciem. Średnio zawiesina komórek zawierała 10 x 106 komórek / ml przy 11,8 x 106 cpm / ml, a procent CE w makrofagach wynosił 65%. Badania in vivo. Protokoły dla zwierząt zostały zatwierdzone przez Institutional Animal Care and Use Committee na University of Pennsylvania. Dwa niezależne eksperymenty z zastosowaniem nadekspresji wątrobowego SR-BI przeprowadzono u samic myszy, jednej z myszami typu dzikiego i jednej z ludzkimi myszami transgenicznymi apoA-lp. Wszystkie myszy karmiono standardową karmą dla dzieci. Dziki typ C57BL / 6 lub ludzkie myszy transgeniczne apoA-lp na podłożu C57BL / 6 (The Jackson Laboratory) wstrzyknięto dożylnie rekombinowany wektor adenowirusowy drugiej generacji, kodujący cDNA ludzkiego SR-BI (n = 6) lub kontrolną zerową. wektor adenowirusowy (n = 6) (1,0 × 1011 cząsteczek na mysz) [patrz też: aspergiloza, masło z orzechów laskowych, krem z groszku kwestia smaku ] [więcej w: parafia trzebinia, aspergiloza, krem z groszku kwestia smaku ]