Modele Drosophila i ssaków odkrywają rolę genu fuzji mioblastycznej TANC1 w mięśniakomięsaku prążkowanokomórkowym ad 5

Surowe dane zostały zdeponowane w bazie danych ArrayExpress (nr dostępu E-MTAB-839). Hodowla komórkowa, transfekcje i linie komórkowe. Komórki C2C12 (ATCC) hodowano w DMEM (Sigma-Aldrich) z 20% FBS (Atlas Biolabs). W celu różnicowania DMEM uzupełniono 2% surowicą końską (Sigma-Aldrich). Komórki RMS-13 (ATCC) hodowano w RPMI 1640 (Sigma-Aldrich) z 10% FBS. Wszystkie shRNA otrzymano z Open Biosystems. Transfekcje przeprowadzono przez elektroporację (320 V, 960 (F, Bio-Rad Gene Pulser II). Komórki trypsynizowano, stosując trypsynę / EDTA po osiągnięciu konfluencji 70%, ponownie zawieszono w pożywkach Opti-MEM i poddano elektroporacji. Do barwienia zastosowano 1% roztwór krystalicznego fioletu formalinowego. Stabilne linie komórkowe PAX3-FOXO1 i eGFP wytworzono przy użyciu wektora pBabe (Addgene) i wektora do pakowania pCK (Roche-Applied Science); Linie nadekspresji i linie kontrolne Tanc1 wytworzono przy użyciu wektora pDsRed2-C1 (Clonetech) i pCK; wirus wygenerowano za pomocą wektora 6 .g, 6 .g pCK i 36 .l mieszaniny Fugene dodano do 70% konfluentnych komórek 293T, a następnie zebrano po 72 godzinach. Komórki C2C12 zakażono wirusem polibrenem i wybrano 15 ug / ml blasterydyny na 2 dni, następnie 10 ug / ml przez 5 dni. Statystyka. Dane reprezentują średnią. SEM. Istotność różnic określono przez niesparowany dwustronny test Studenta. Wartość AP mniejsza niż 0,05 została uznana za znaczącą. Zatwierdzenie badania. Badania z ludzkimi nowotworami i mięśniami szkieletowymi były stosowane bez informacji identyfikujących pacjentów i zostały uznane za wyłączone z przeglądu i zatwierdzenia IRB. Materiały uzupełniające Zobacz Dodatkowe dane Podziękowania Jesteśmy wdzięczni Thomasowi Geraldowi i Linh Tran za doskonałe wsparcie techniczne oraz Kristine Leos i Shama Khokhar za wsparcie IHC. Dziękujemy Markowi Hatleyowi, Rhondzie Bassel-Duby, Diego Castrillonowi i Ericowi Olsonowi za recenzję rękopisu. Pracę tę wspierała Rada Naukowa UTSW, Children s s Cancer Fund (Dallas, Texas, USA), Burroughs Wellcome Career Award for Medical Scientists i Alex s Lemonade Stand Foundation. Nagroda. Przypisy Konflikt interesów: Autorzy zadeklarowali brak konfliktu interesów. Informacje referencyjne: J Clin Invest. 2012; 122 (1): 403. 407. doi: 10,1172 / JCI59877.
[podobne: pasta tahini gdzie kupić, niewydolność nerek objawy, korekcja nosa kwasem hialuronowym ]
[patrz też: krem z groszku kwestia smaku, ćwiczenia oddechowe w rehabilitacji, jak ugotowac kasze jaglana ]