Astrocytarne uwalnianie wapnia pośredniczy w depolaryzacji okołozawałowej w modelu udaru gryzonia cd

Szybkość erytrocytów spadła do 23,3%. 7,1% w porównaniu z wartością wyjściową, co potwierdza, że nasze pomiary przeprowadzono w korze około-zawałowej. Po pMCAO wykryliśmy powtarzające się PID w obszarze obrazowania (ryc. 1, A i B). Jak wcześniej podano (6. 8), fala wapnia zmieniająca się podczas PID obejmowała astrocyty i neurony i propagowane przez region obrazowania (Figura 1, A i B, i Suplementowe Wideo 2). Figura 1Astrocytarny IP3R2 przyczynia się do zwiększenia poziomu wapnia związanego z PID. (A i B) OGB-1 AM wstrzyknięto do kory okołoporodowej, a myszy eksprymujące ECFP pod promotorem Cx43 obrazowano przy użyciu mikroskopii wielofotonowej. PID zidentyfikowano za pomocą typowej propagacji komórkowych stężeń wapnia w neuronach (n1. N4) i astrocytach (a1a4, zidentyfikowanych przez ich ekspresję ECFP). Groty strzałek w B wskazują na propagację. Pasek skali: 50 .m. (C i D) Amplituda wapnia w astrocytach z Cx43-ECFP Ip3r2. /. myszy (n = 117 komórek od 5 myszy) były znacząco mniejsze w porównaniu z myszami kontrolnymi Cx43-ECFP Ip3r2 + / + (n = 147 komórek od 9 myszy), podczas gdy prędkości propagacji pozostały podobne. (E i F) Amplituda neuronalnych stanów przejściowych wapnia podczas PID była również zmniejszona w Cx43-ECFP Ip3r2. /. myszy w porównaniu z kontrolami, podczas gdy prędkość pozostała niezmieniona (n = 104 komórki od 5 myszy vs. n = 142 komórki od 9 myszy). (G. I) Wysoka rozdzielczość czasowa i przestrzenna obrazowania astrocytów (zidentyfikowanych przez ekspresję ECFP) i neuronów podczas PIDs pokazała, że astrocyty są opóźnione za sąsiednimi neuronami o 1,29. 0,7 sekundy u myszy kontrolnych Cx43-ECFP Ip3r2 + / + i 0,40. 0,6 sekundy w ECFP Ip3r2. /. myszy (n = 8 par neuron-astrocyt z 4 myszy kontrolnych vs. n = 6 par od 3 myszy Ip3r2 (3 / y). Pasek skali: 10 .m. Wykresy boksu i wąsów Tukeya wskazują medianę (linię), średnią (okrąg), IQR (pole) i 1,5 IQR (wąsy) na wszystkich figurach. Wszystkie wartości P zostały określone za pomocą testu U Manna-Whitneya. Ctl, kontrola;