Astrocytarne uwalnianie wapnia pośredniczy w depolaryzacji okołozawałowej w modelu udaru gryzonia ad 5

Ponadto, aby wykluczyć możliwość, że na próg PID wpłynęła zmieniona dynamika CBF podczas PID w wyniku osłabionej sygnalizacji wapnia w Ip3r2. /. myszy, określiliśmy odpowiedź lokalnych tętniczek kory na PID. W tym celu wyznakowaliśmy układ naczyniowy za pomocą dekstranu Texas Red i zmierzyliśmy średnicę penetrujących tętniczek, zidentyfikowanych przez ich specyficzne wiązanie z Alexa Fluor 633 (17) (Suplementowa Figura 5A). Okazało się, że typowe zmiany CBF podczas PID, które obejmują wyraźne zwężenie naczyń, a następnie zmienne rozszerzenie naczyń krwionośnych (Figura 2, H i I) (18), pozostały niezmienione w Ip3r2. /. myszy w porównaniu z kontrolami (Figura 2, J i K). Podobnie, skumulowany ciężar hipoperfuzji związanej z PID był podobny (Suplementalna Figura 5B), chociaż można spekulować, że zmniejszona częstotliwość PID może powodować mniejsze obciążenie hipoperfuzją w późniejszych punktach czasowych. Podsumowując, nasze dane pokazują, że uwalnianie wapnia bramkowane przez IP3R2 z magazynów wewnętrznych silnie przyczynia się do częstości PID w niedokrwieniu, jak również do przeciążenia komórek wapniem podczas każdego PID, ostatecznie prowadząc do zmniejszonej objętości zawału i zwiększonego przeżycia neuronów. Aby lepiej zrozumieć, w jaki sposób astrocytarny wapń może pośredniczyć w tych działaniach, zbadaliśmy kinetykę glutaminianu, która może być modulowana przez astrocyty (19) i jest uwalniana podczas rozprzestrzeniania depolaryzacji (4, 5). W tym celu wstrzyknęliśmy intrakortycznie wirusa związanego z adenowirusem (AAV) kodującego fluorescencyjny wskaźnik glutaminianu iGluSnFR (20) pod promotorem glialowego kwaśnego białka fibroblastycznego (GFAP) 2 tygodnie przed pMCAO. Spowodowało to silną ekspresję iGluSnFR przez astrocyty (Figura 3A i dodatkowa Figura 6, A i B). Figura 3 Przekazanie sygnału przez astroglej IP3R2a przyczynia się do kinetyki glutaminianu podczas PID. (A) Projekcja średniej intensywności korowej około-zawałowej wykazała swoistą i dostateczną ekspresję iGluSnFR w astrocytach korowych. Układ naczyniowy wizualizowano za pomocą dekstranu Texas Red (TR). Pasek skali: 50 .m. (B) Wystąpiło silne obniżenie czasu trwania przemijających glutaminianów, które było głównie spowodowane przez osłabienie drugiej (utrzymującej się) fazy wzrostu glutaminianu, wskazane przez znacznie skrócony czas od szczytu do początku i całkowity czas trwania w połowie maksimum. (FDHM) (n = 48 komórek od 9 myszy Ip3r2 (3, n = 70 komórek od 10 myszy kontrolnych). (C. E) Jednoczesne obrazowanie glutaminianu (iGluSnFR) i wapnia (Cal-590) w poszczególnych astrocytach (strzałki) wykazało, że początkowy wzrost glutaminianu poprzedzał astroglejowy przejściowy wapń, ale ten przejściowy poziom wapnia zbiegł się ze wzrostem wtórnego glutaminianu (n = 25 astrocytów z 5 myszy Ip3r2 (3, n = 28 astrocytów z 5 myszy kontrolnych)
[przypisy: jak ugotowac kasze jaglana, rehabilitacja po rekonstrukcji więzadła krzyżowego przedniego, kapelusz słomkowy krzyżówka ]
[patrz też: kapelusz słomkowy krzyżówka, białko serwatkowe a odchudzanie, parafia płoki ]