Tetramery MHC klasy II identyfikują specyficzne dla peptydu ludzkie limfocyty T CD4 + proliferujące w odpowiedzi na antygen grypy A ad

W drugiej rundzie amplifikacji jako produkt początkowy (+) na pN15LZ użyto produktu pierwszej rundy. szablon, który zawiera podstawowy motyw cDNA LZ, w stężeniu 10 pM, w celu utworzenia chimery DRA1 / LZ (pN15LZ . i pN15LZ . były prezentami D. Ostrov i S. Read more „Tetramery MHC klasy II identyfikują specyficzne dla peptydu ludzkie limfocyty T CD4 + proliferujące w odpowiedzi na antygen grypy A ad”

Tetramery MHC klasy II identyfikują specyficzne dla peptydu ludzkie limfocyty T CD4 + proliferujące w odpowiedzi na antygen grypy A

Specyficzne dla antygenu komórki pomocnicze T obecne w krwi obwodowej przy bardzo niskich częstotliwościach są zdolne do szybkiego ekspansji klonalnej podczas prowokacji antygenem. Wyjątkowa swoistość tej odpowiedzi zapewnia aktywację i ekspansję bardzo wybranej kohorty limfocytów T, cechę, którą wykorzystaliśmy do bezpośredniej identyfikacji i ilościowego oznaczenia komórek pomocniczych T specyficznych wobec epitopu z krwi obwodowej. Rozpuszczalne tetrameryzowane cząsteczki MHC klasy II, obciążone immunodominującym peptydem z hemaglutyniny (HA) i znakowane barwnikami fluorescencyjnymi, skonstruowano i zastosowano do bezpośredniego identyfikowania antygenowo specyficznych komórek T od osobników z grypą. Po 7 dniach proliferacji w odpowiedzi na stymulację przez peptyd HA lub całą szczepionkę przeciwko grypie, komórki barwiące pozytywnie tetramerem HA poddawano od 6 do 9 podziałów i były to CD3 +, CD4 +, CD25 + i CD8a, charakterystyczne dla aktywowanych komórek pomocniczych T odpowiadających na do antygenu. Specyficzny dla epitopu HA składnik złożonej odpowiedzi na całą szczepionkę przeciw grypie stanowił główny podzbiór proliferujących komórek pomocniczych T. Read more „Tetramery MHC klasy II identyfikują specyficzne dla peptydu ludzkie limfocyty T CD4 + proliferujące w odpowiedzi na antygen grypy A”

Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo ad 5

Trzy dni po wstrzyknięciu wektora wstrzyknięto dootrzewnowo komórki J774 znakowane cholesterolem i [3H] cholesterolu (0,5 ml). myszy umieszczono osobno w klatkach. Osocze zbierano po 24 godzinach i 48 godzinach i stosowano do zliczania scyntylacyjnego płynu i do analizy lipoprotein. Radioaktywność w osoczu wyrażono jako procent całkowitego wstrzykniętego [3H] cholesterolu na mililitr plazmy. Kał pobierano od 0 do 48 godzin i przechowywano w temperaturze ~ 20 ° C przed ekstrakcją lipidów. Read more „Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo ad 5”

Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo czesc 4

CETP przenosi CE z HDL na lipoproteiny zawierające apoB w zamian za triglicerydy, a zatem odgrywa ważną rolę w metabolizmie HDL-C (32). Przenoszenie HDL CE za pośrednictwem CETP do lipoprotein zawierających apoB z późniejszym wychwytem zależnym od receptora w wątrobie może być ważną drogą RCT u gatunków, które eksprymują CETP. Rzeczywiście, badanie kinetyczne u ludzi sugerowało, że zdecydowana większość wstrzykniętego znacznika CE HDL, który ostatecznie został wydalony do żółci, została pobrana przez wątrobę po przeniesieniu do lipoprotein zawierających apoB (27). Co ważne, większość wstrzykniętego znacznika UL HDL, który został wydalony z żółcią, został przeniesiony bezpośrednio do wątroby z HDL (27). W każdym przypadku ilościowa rola wątrobowego SR-BI w regulacji makrofagów RCT u ludzi i innych gatunków, które eksprymują CETP może być różna niż u myszy. Read more „Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo czesc 4”

Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo cd

Nasze badania wskazują, że myszy z niedoborem SR-BIa mają znacznie zmniejszone RCT makrofagów na kale. Mechanizmy, dzięki którym niedobór wątrobowego SR-BI upośledza makrofagi netto RCT, nie zostały jeszcze w pełni określone. Oprócz upośledzenia wychwytu wątrobowego HDL-C może również występować upośledzenie mobilizacji cholesterolu z makrofagów w wyniku niedoboru SR-BI w wątrobie. Zgodnie z argumentem przedstawionym powyżej dla nadekspresji SR-BI, brak mediowanego przez SR-BI. Przetwarzania HDL przez wątrobę może skutkować cząstkami HDL, które mają upośledzoną zdolność do usuwania cholesterolu makrofagowego. Read more „Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo cd”

Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo ad

Myszy transgeniczne apoA-lpz nadeksprymującym wątrobę SR-BI miały znaczny wzrost wydalania [3H] znacznika w kale w ciągu 48 godzin (Figura 1B). Tak więc nadekspresja wątrobowego SR-BI zmniejsza w stanie stacjonarnym stężenie HDL-C w osoczu, ale znacznie zwiększa wydalanie z kałem [3H] cholesterolu pochodzącego z makrofagów, co wskazuje na przyspieszenie tempa RCT makrofagów na odchody. Przeprowadziliśmy również 2 niezależne badania na myszach z nokautem SR-BI-a w porównaniu z myszami z miotu typu dzikiego, a ponieważ wyniki były bardzo podobne, wyniki zebrano do analizy. Jak oczekiwano, myszy z nokautem SR-BI (3) miały wyższe poziomy HDL-C niż myszy kontrolne typu dzikiego (158. 14 vs. Read more „Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo ad”

Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo

Hepatyczna ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) sprzyja selektywnemu wychwytowi cholesterolu HDL przez wątrobę i uważa się, że odgrywa rolę w procesie odwrotnego transportu cholesterolu (RCT). Postawiliśmy hipotezę, że wątrobowa ekspresja SR-BI jest regulatorem tempa integracji makrofagów z odchodami RCT i wykorzystuje model in vivo do testowania tej hipotezy. Do makrofagów J774 obciążonych cholesterolem i [3H] cholesterolu wstrzyknięto dootrzewnowo myszom, po czym oznaczono ilościowo poziom cholesterolu [3H] w osoczu, wątrobie i kale w ciągu 48 godzin. Myszy z nadekspresją SR-BI w wątrobie znacząco obniżyły poziom cholesterolu [3H] w osoczu, ale znacznie zwiększyły wydzielanie znacznika [3H] w kale w ciągu 48 godzin. Odwrotnie, myszy z niedoborem SR-BI znacznie zwiększały poziom cholesterolu [3H] w osoczu, ale znacznie zmniejszały wydzielanie znacznika [3H] w kale w ciągu 48 godzin. Read more „Wątrobowa ekspresja receptora wymiatacza klasy B (SR-BI) jest pozytywnym regulatorem transportu odwrotnego cholesterolu makrofagów in vivo”

TGF- w patogenezie i zapobieganiu chorobie: kwestia proporcji tętniaków ad 5

Ponadto połączenie IL-6 i TGF-a może indukować wytwarzanie komórek Th17 z albo naiwnych komórek pomocniczych T CD4 + T, albo Treg, zdarzenia, które indukuje ekstremalne środowisko prozapalne (38). Perspektywa Wzięte razem, badania omówione w tym komentarzu podkreślają złożone i zależne od kontekstu role TGF-. w chorobie. Z terapeutycznego punktu widzenia istotne wydaje się zdefiniowanie krytycznych zdarzeń w patogenezie choroby, zarówno w górę, jak i w dół od TGF-a, w celu uniknięcia zagubienia się w hałasie. Najlepiej można to osiągnąć za pomocą genetycznie zdefiniowanych modeli zwierzęcych, które ściśle replikują mechanizm choroby i fizjologiczną złożoność ludzkiej kondycji. Read more „TGF- w patogenezie i zapobieganiu chorobie: kwestia proporcji tętniaków ad 5”

TGF- w patogenezie i zapobieganiu chorobie: kwestia proporcji tętniaków czesc 4

Na tej podstawie autorzy ostrzegają przed ekstrapolowaniem strategii leczenia MFS na inne prezentacje tętniaka. Choć z natury jest to prawda, niezależnie od ustaleń zawartych w tym badaniu, czy to zalecenie można udoskonalić. Zmiany obserwowane u myszy C57BL / 6, którym podawano TGFa i NAb i Ang II2 były podobne do tych w innych modelach gryzoni opartych na infuzji Ang II, w tym intensywne naciekanie makrofagów i limfocytów, które rozpoczynają się w przydance i elastolizie (aczkolwiek ogniskowa i niejednolity) w mediach. Co niezwykłe, zapalenie i tworzenie tętniaka obserwuje się w ciągu kilku dni po wlewie, a śmierć z powodu rozwarstwienia występuje w ciągu kilku dni do kilku tygodni. Na tej podstawie wydaje się uzasadnione postawienie hipotezy, że antagonistów TGF-a, znanej silnej cytokiny przeciwzapalnej, należy w szczególności unikać w hiperacentycznych tętniakach zapalnych (chociaż trudno jest wyobrazić sobie człowieka powiązanego z tą prezentacją). Read more „TGF- w patogenezie i zapobieganiu chorobie: kwestia proporcji tętniaków czesc 4”

TGF- w patogenezie i zapobieganiu chorobie: kwestia proporcji tętniaków cd

Ukierunkowane zakłócenie Sgcg spowodowało poważniejszą chorobę w szczepie DBA / 2J (D2) w porównaniu ze szczepem 129T2 / SvEmsJ (129 szczep) przy użyciu markerów przecieku błony i zwłóknienia jako miar wynikowych. Co godne uwagi, wykazano, że zmienność modyfikująca oba fenotypy umiejscowione w pojedynczym locus na chromosomie 7, która zawiera geny kodujące zarówno TGF-pi i LTBP4, jak i wiele innych. Podczas gdy nie zaobserwowano żadnej zmiany sekwencji w Tgfb1, w sekwencji kodującej Ltbp4 wystąpił dimorfizm insercyjny / delecyjny (indel) powodujący utratę 12 aminokwasów w predysponowanej postaci (D2) białka w obrębie domeny, która jest cięta przez wybrane aktywatory TGF-y. Fibroblasty pochodzące od myszy D2 wykazywały zwiększony stosunek rozszczepionego do nierozszczepionego LTBP4 po ekspozycji na pankreatynę lub plazminę, w porównaniu ze szczepem 129, podobnie jak rekombinowany peptyd LTBP4 z D2 obejmujący indel. Fibroblasty D2 (z lub bez docelowego Sgcg) również wykazywały zwiększoną fosforylację Smad2 po traktowaniu rekombinowanym TGF-a. Read more „TGF- w patogenezie i zapobieganiu chorobie: kwestia proporcji tętniaków cd”